Banca de DEFESA: EMANUELLE CRISTINE PEREIRA DE SOUSA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: EMANUELLE CRISTINE PEREIRA DE SOUSA
DATA: 25/06/2023
HORA: 15:00
LOCAL: Sala Virtual - Plataforma Google Meet
TÍTULO:

"DETECÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE PARASPORINA EM ISOLADOS DE Bacillus thuringiensis (BERLINER 1911) DE OCORRÊNCIA NO MARANHÃO"

PALAVRAS-CHAVES:

Bactéria Entomopatogênica, Proteína Parasporina, Atividade Hemolítica.

PÁGINAS: 54
GRANDE ÁREA: Ciências Agrárias
ÁREA: Medicina Veterinária
RESUMO:

Bacillus thuringiensis é uma bactéria entomopatogênica que possui plasmídeos codificadores de várias proteínas pesticidas produzidas como inclusões cristalinas durante a esporulação, como a proteína Cry que tem atividade pesticida estabelecida a diversos invertebrados-praga. No entanto, o B. thuringiensis produz proteínas Cry que não possuem atividades pesticida e hemolítica, e que têm atividade tóxica contra diversas linhagens de células cancerígenas humanas. Essas proteínas Cry são denominadas Parasporinas. Dessa forma, esse estudo objetivou realizar uma bioprospecção de proteínas Parasporinas em isolados de B. thuringiensis do Maranhão. Os isolados de B. thuringiensis foram obtidos a partir de amostras de solo coletadas em diversos municípios do Maranhão, identificados quanto à forma da colônia, crescimento em meio com penicilina e presença do cristal. Testes de patogenicidade foram realizados para selecionar isolados sem ou com baixa taxa de mortalidade em larvas de Aedes aegypti, em seguida, foi realizada a extração do DNA e a prospecção de genes de parasporinas. Teste de atividade hemolítica foi realizado apenas para os isolados que amplificaram para gene de pararasporina. Foram obtidas 198 colônias de B. thuringiensis que cresceram em meio seletivo contendo penicilina e que apresentaram cristal, com o índice B. thuringiensis médio de 0,50. Dos 198 isolados, 174 (87,88%) foram submetidos aos testes de patogenicidade e porcionaram mortalidade < 20% contra larvas de Ae. aegypti. Os 174 isolados de B. thuringiensis foram utilizados para detectar Parasporina com os primers PS1, PS2, PS3, PS4, PS5 e PS6. Os isolados BtMAs-1196 e BtMAs-1254 amplificaram para o gene ps1 e quando submetido ao teste hemolítico, estes isolados apresentaram formação de halo hemolitico intermediário. O fato dos isolados BtMAs-1196 e BtMAs-1254 terem amplificados para o gene ps1 os tornam fortes candidatos para avaliação da sua atividade citotóxica, mas se faz necessário estudos mais aprofundados sobre o mecanismo de ação da proteína PS1, bem como, a suscetibilidade do receptor de células cancerígenas à proteína PS1 desses isolados, que poderão tornar viável a utilização desta proteína como terapia alternativa para o tratamento de câncer, ou até mesmo como ferramenta molecular para o diagnóstico dessa doença.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - 6443 - ELMARY DA COSTA FRAGA
Externo ao Programa - 004.285.843-73 - JOSE RIBAMAR MUNIZ CAMPOS NETO - IFECT
Presidente(a) - 6445 - MARIA CLAUDENE BARROS
Externo à Instituição - RICARDO ANTÔNIO POLANCZYK - UNESP