Banca de QUALIFICAÇÃO: NAYARA SILVA OLIVEIRA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: NAYARA SILVA OLIVEIRA
DATA: 09/02/2022
HORA: 15:00
LOCAL: Sala Virtual- Plataforma Microsoft Teams
TÍTULO:

"IDENTIFICAÇÃO MOLECULAR E CARACTERIZAÇÃO GENOTÍPICA DE ISOLADOS DE Malassezia pachydermatis DE CÃES COM OTITE EXTERNA"

PALAVRAS-CHAVES:

Leveduras oportunistas, Candida sp., Malasseziose

PÁGINAS: 41
GRANDE ÁREA: Ciências Agrárias
ÁREA: Medicina Veterinária
RESUMO:

Malassezia é um gênero de leveduras lipodependentes, que vive na superfície da pele e mucosas de diversos mamíferos e aves. A espécie M. pachydermatis é a mais atribuída na casuística de otite externa fúngica em cães Otite externa, uma desordem cutânea multifatorial, caracterizada principalmente por inflamação no conduto auditivo de cães. Neste sentindo, este trabalho teve como objetivo caracterizar os isolados de Malassezia spp. obtidos de cães com otite externa, em relação às suas características bioquímicas, identificação molecular e análise filogenética, atendidos no Hospital Veterinario Universitario “Fancisco Edilberto Uchôa Lopes” (HVU – UEMA) da cidade de São Luís. Para identificação direta, isolamento fúngico e provas bioquímicas, foram coletadas 110 amostras do conduto auditivo de 55 cães, atráves de swabs estéreis no terço proximal da porção externa do meato acústico, sendo realizado duas coletas em cada orelha, uma para  confecção do esfregaço para exame direto e outra utilizado para cultivo fúngico. Para análise molecular, foram utilizadas 30 amostras de cães positivos no exame direto e crescimento da levedura com características compatíveis com Malassezia spp.em meio de cultura, utilizando o protocolo de extração de DNA de fenol/clorofórmio/isoamílico e PCR convencional para a amplificação da região NL1/NL2 da subunidade maior do gene 26S rRNA, seguido do sequencimento de amostras positivas na amplificação. No exame direto das 110 amostras, foi observado que em 100 (90,9%) havia presença de algum agente microbiano (leveduras e bactérias), em 71 foram observadas somente estruturas semelhantes a Malassezia sp., e em 20 foi caracterizada a presença de infecção mista, com bactérias e leveduras. Malassezia sp. foi isolada em 83 (75,45%) das 110 amostras de swab colhidos, sendo todas positivas no teste bioquímico de catalase, enquanto que para o teste de urease, verificou-se positividade em 80 (96,4%) das amostras isoladas, podendo inferir que a espécie em estudo se tratava de M. pachydermatis. Quanto as análises moleculares, das 30 amostras isoladas sugestivas de Malassezia sp. submetidas à PCR convencional, 24 apresentaram padrão de banda de 600pb, oito amostras foram submetidas ao sequenciamento, onde a análise BLAST das sequências da região D1/D2 da subunidade maior do gene 26S rRNA, revelou que seis eram idênticas a várias sequências de DNA ribossômico de M. pachydermatis, mostrando 100% de cobertura e 100% de identidade, e duas eram de Candida orthopsilosis e Candida tropicalis, com também, 100% de cobertura e 100% de identidade. A importância de estudos acerca de Malassezia spp. no acometimento de cães com otite externa é observado através da frequencia de detecção desse patógeno na maioria dos casos avaliados. As análises molecular foram eficientes na identificação das espécies de isolados de Malassezia, e também na identificação de duas espécies de Candida (C. orthopsilosis e C. tropicalis), confirmando a importância e necessidade da utilização de métodos moleculares para diagnóstico de patologias como a otite externa em cães.

 

MEMBROS DA BANCA:
Interno - 7319 - ALCINA VIEIRA DE CARVALHO NETA
Presidente(a) - 6443 - ELMARY DA COSTA FRAGA
Externo ao Programa - 839967 - LARISSA SARMENTO DOS SANTOS