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DIVERSIDADE, ISOLAMENTO E ANÁLISE FILOGENÉTICA DE PARASITAS DO GÊNERO Trypanosoma DE MORCEGOS DO ESTADO DO MARANHÃO
Amazonia,quirópteros, tripanossomatídeos
RESUMO
As espécies do gênero Trypanosoma são protozoários da família Trypanosomatidae, cujo ciclo biológico se desenvolve alternadamente em mamíferos de várias classes e insetos reduvídeos. Pouco se sabe sobre quais desses parasitos estão presentes nos morcegos do Maranhão e qual o papel dos morcegos na manutenção dos tripanossomatídeos em ciclos silvestres e peri-domiciliares. O objetivo do estudo foi verificar a presença de parasitas do gênero Trypanosoma que circulam em morcegos dos municípios maranheense de Turiaçu, Godofredo Viana, Cândido Mendes e Carutapera, A captura dos animais foi realizada em duas campanhas, a primeira em abril/2017 e a segunda em março/2018, com 07 dias de duração cada. Para a coletas foram utilizadas oito redes de neblina que foram armadas das 18:00 às 00:00h e vistoriadas em intervalos de 30 minutos. Para o isolamento das espécies de tripanossomas, as amostras de sangue coletadas foram semeadas em tubos contendo um meio de cultura bifásico onde retirou-se uma alíquota colocando-se entre lâmina e lamínula e examinada a fresco em microscópio óptico. O sangue obtido foi utilizado para a confecção de três lâminas de esfregaços sanguíneos, por amostra, que foram corados com Giemsa e analisados no microscópio óptico. Para análises moleculares amostras de sangue, de baço e fígado dos animais eutanasiados foram coletadas. A extração de DNA foi realizada de acordo com o protocolo estabelecido pelo Kit GeneJet Genomic DNA Purification e amplificação foi realizada usando através dos marcadores moleculares V7V8 e o gGAPDH . Um total de 81 morcegos foram capturados. Não foram identificados parasitos nos esfregaços sanguíneos, porém houve 4 culturas positivas para Trypanosoma, entretanto elas não se estabeleceram. 57 amostras de tecido (sangue, baço e fígado) dos municípios de Turiaçu e Candido Mendes foram analisadas e destas 25 apresentaram-se positivas para o DNA barcoding para tripanossomatídeo (V7V8) dos genes SSU rDNA. Posteriormente estas 25 foram testadas para o gene gGAPDH e 11 amostras foram positivas. A diversidade de espécies, a presença constante de morcegos nas áreas estudadas e o encontro de animais positivos evidencia a importância ecológica dos quirópteros e o fato de que estes não devem ser excluídos como potenciais reservatórios para tripanossomatídeos de interesse médico.