CARACTERIZAÇÃO DE INSETOS DA ORDEM EPHEMEROPTERA (INSECTA) EM TRIBUTÁRIOS DO RIO ITAPECURU ATRAVÉS DE MARCADORES MITOCONDRIAIS
Insetos, Genes Mitocondriais, Itapecuru e Maranhão.
A ordem Ephemeroptera ocupa quase todos os ambientes aquáticos, e são sensíveis as alterações ambientais, por isso considerados bioindicadores de qualidade de água e ambiental, fazendo parte do grupo dos ETP (Ephemeroptera, Tricoptera e Plecoptera). Apesar da grande importância, a dificuldade ou limitação do avanço da identificação morfológica cria obstáculos ao avanço dos estudos para essa ordem de insetos. Um exemplo são as chaves taxonômicas que geralmente existem apenas para um determinado estágio de vida ou gênero e suas estruturas que são facilmente danificadas ou perdidas, assim ferramentas moleculares como marcadores moleculares mitocondriais vem auxiliando nessa problemática. Diante disso, esse trabalho tem como objetivo caracterizar e delimitar espécies/gêneros da ordem Ephemeroptera em rios e riachos da Bacia do Itapecuru, no Cerrado do Leste Maranhense, utilizando sequências dos genes mitocondriais rRNA 16S e COI. As coletas das ninfas e adultos foram realizadas em trechos de rio e riachos nas delimitações da Bacia Hidrográfica do Rio Itapecuru, posteriormente os espécimes foram identificados usando chaves de identificações específicas para a família Leptophlebiidae. Materiais depositados no Laboratório de Entomologia Aquática do CESC/UEMA, foram submetidas as técnicas moleculares como a Extração de DNA, amplificação dos genes via PCR e sequenciamento. Os produtos do sequenciamento foram submetidos a softwares para realizar as análises filogenéticas, distâncias genéticas e delimitação de espécie para o gene COI. Foram obtidas 122 sequências, sendo 82 para o gene rRNA 16S e 40 para o gene COI, as análises foram realizadas com os dados concatenados, obtendo um fragmento de 1121 pares de bases, correspondendo a 17 gêneros, 26 espécies e cinco famílias, com médias das divergências genéticas intraespecíficas variando de 0 a 0,3% e interespecíficas de 1,20 a 55,30%. Os agrupamentos pelas reconstruções filogenéticas de Máxima verossimilhança (ML) e Inferência Bayesiana (BI) apresentaram clados fortemente sustentados, indicando concordância com as espécies atribuídas por identificação morfológica, com exceção de Hidrosmilodon sp. e Hidrosmilodon gillieesae, que se apresentaram em clados separados. As análises de delimitação de espécies para o gene COI identificaram 17 OTUs para os métodos ABGD, ASAP, PTP e 16 para o GMYC. Novos registros de gêneros/espécie foram confirmados para o Maranhão como Hagenulopsis, Cloeodes, Caenis e Campylocia anceps. Gerando uma base de dados genéticos pioneiros para o estado do Maranhão, cuja utilização poderá ter implicações diretas nos estudos taxonômicos e de conservação para a ordem.