VIABILIDADE DO USO DE ESPERMATOZÓIDES CRIOPRESERVADOS DE Colossoma macropomum (CUVIER, 1816) EXPOSTOS A CIPERMETRINA
bioensaio; peixe amazônico; motilidade espermática; piretróide.
Cipermetrina é um composto agrotóxico muito utilizado no combate de insetos em ambientes agrícolas e domésticos, mas seu uso indiscrimado e descartes inadequados das embalagens pode causar efeitos adversos aos animais que vivem em ambientes direta ou indiretamente afetados. Neste trabalho objetivou-se analisar a viabilidade do uso de espermatozóides de tambaqui (Colossoma macropomum) em bioensaios ecotoxicológicos com cipermetrina. Foram utilizadas amostras seminais de machos de tambaqui sexualmente maduros. O sêmen fresco foi coletado oito horas pós indução hormonal em tubos de vidro graduados. Após avaliação inicial de ausência de ativação prévia foi realizado o experimento em esquema fatorial testadando cinco concentrações de cipermetrina (2,5; 25; 125; 250 e 500 mg/L), onde a motilidade foi avaliada pelo método subjetivo e os dados expressos em porcentagem de células móveis nas amostras por tempo em segundos. Foi avaliada a dose letal (DL50) a partir da ativação dos gametas até regredir em 50% de motilidade nas amostras; o tempo total de atividade foi registrado até 10% de células móveis (em segundos) após sua ativação inicial. Como controle, foi utilizada a ativação com solução de NaCl a 0,9% e análise da motilidade da mesma forma descrita para a cipermetrina. Na etapa de criopreservação foi realizado o preparo das soluções crioprotetoras, com as concentrações 75% de glicose, 10% de DMSO, 5% de gema de ovo. Em seguida o sêmen foi colocado em micropalhetas e acondicionado em dryshipper com nitrogênio por até 20 minutos. Após a estabilização da temperatura, as amostras foram transferidas para o nitrogênio líquido a temperaratura de -196°C. Para o descongelamento, as amostras foram retiradas do nitrogênio líquido e postas em banho maria a 60°C durante 8 segundos, transferidas para tubos plásticos e analisados. As análises do sêmen foram feitas em microscópio ótico e avaliada a viabilidade espermática por meio da ativação com a solução de NaCl. Após a confirmação da viabilidade pela análise da caracterização espermática, as amostras foram ativadas pelas concentrações de cipermetrina e estabelecida a taxa de motilidade subjetiva e o tempo de motilidade em triplicatas, levando em consideração a Dose letal (DL50) para cada repetição. Resultados apontam que as amostras in natura baseadas no método subjetivo apresentaram o tempo de duração médio de 118±12 segundos (considerando até 10% de motilidade espermática) e 95±5% conforme o percentual de células móveis. A redução da motilidade espermática ocorreu de forma significativa (p<0,05), principalmente na concentração de cipermetrina de 500 mg/L. Nas amostras descongeladas o tempo médio foi de 46,9±10 segundos e sua taxa de motilidade 73,9±6% para células móveis. A redução da motilidade foi mais intensa a partir da concentração 125mg/L, indicando o seu limite celular de tolerância ao inseticida. Os testes realizados demonstram que o sêmen de tambaqui é sensível ao processo de exposição aos resíduos de cipermetrina, podendo ser utilizado em bioensaios ecotoxicológicos.